Для RF100-400mm F5.6-8 IS USM приведено минимальное расстояние съемки — 88 см, достигаемое при фокусном расстоянии 200 мм, и максимальное увеличение — 0,41x, достигаемое при фокусном расстоянии 400 мм. Объектив оснащен стабилизатором изображения, обеспечивающим при использовании объектива с камерами EOS R5 и R6 выигрыш до  6 EV, а при использовании с камерами EOS R и RP — до 5,5 EV. Объектив совместим с телеконвертером RF1.4x и RF2x.